1、3精液液化后,先做精液常规分析,并记录。
2、精液处理在超净工作台内进行。
3、离心300g10分钟去上清,加1ml培养液,混悬离心5O。
1、多层法就是应用不同密度梯度的Percoll各1ml,放入一无菌无毒的16mm×125mm试管中,密度最大者放入试管底部,向上依次递减,表面密度最小,这样就形成了不连续的Percoll密度梯度,将液化后的精液放在最低密度层的上方,在离心后,试管最底部的部分即为所需的活动力强的精子。多层法可分为12层法。
2、为了了解Percoll所含成分可能对精子生物学功能产生的有害影响,F.Sapienza等对动物精子及人类IVF-ET过程中的精子处理方法进行研究发现,与上游法比较,应用Percoll密度梯度离心法的精子回收率明显增高,而两种方法在精子的活动率、顶体反应率及SPA阳性率方面均无显著差异,而且,其体外受精率明显增高,特别是在精液质量差时更显著。
3、1996年以后,国外IVF中心已不再在临床应用Percoll处理精液,因为Percoll有以下缺点:Percoll含有较高量的内毒素;用Percoll处理过的精液标本,用电子显微镜观察,发现在精子表面黏附了胶体硅微颗粒,他们在精子接触的组织中会引发炎症反应。
①清洗法:适用于精子质量差、精子数低的病人。将液化的精液1:1加入培养液中,进行混合,离心后弃去上清。在消化完成后,再加入培养液进行2次离心清洗。清洗二次后,扔掉上清液,再加入2-3滴的糜蛋白酶,置于培养盒中待用。
②密度梯度离心法:适用于精子质量一般或良好、中等数量或高精子的病人。首先向离心管下层添加80%梯度离心液,然后在上层添加40%梯度离心。再次添加液化精液,离心之后,正常精子将富集到管底。取精管底取精子,用1.5ml培养液离心清洗2-3次。洗完后,扔掉上清液,放入培养盒中待用。
③上游法:适用于精子量大、精子量大的病人。把液化的精液加入到培养液中,活力高的精子会游到培养液上面,使它的活力降低,死亡精子位于离心管底部。
1、北京大学第三医院。作为一家三级甲等医院,其生殖中心的临床诊断和研究水平已达到国内领先和国际先进水平。我国大陆首例试管婴儿,就是在北京大学第三医院诞生的!
2、上海第九人民医院。该院的生殖科在2003年成立。上海九院是上海乃至华东地区首批开展试管婴儿技术的医院之一。此外,还是上海每年最多病例数和每年取卵次数的辅助生殖中心之一。
3、仁济医院。在1987年,仁济医院在上海率先进行人工授精,历经多年发展,技术得到发展,成功率也有所提升。作为上海第一家开展辅助生殖技术的医疗机构,仁济医院在当地的口碑非常好。
4、广州中山医院,这家医院的创始人是中国生殖医学领域最着名的学者之一,他就是庄光伦教授。在1997年,在庄光伦教授和该院众多优秀的医生的努力下,成立了妇科和内分泌与计划生育研究部。帮助试管家庭解决生育难题。
5、中信湘雅生殖与遗传专科医院,该院是一家三甲医院,是现代化生殖与遗传专科医院。
6、北大人民医院。作为一家三级甲等医院,该院在1997年就开始建立自己的生殖中心,成为北医第三医院之后的第二个生殖医学中心。
7、武汉同济医院。同济医院是在中国开展试管婴儿项目的早期医院之一,具有丰富的临床经验。加上试管医生技术精湛,帮助试管家庭解决生育难题。此院也是一家三级甲等医院。
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