由于精子核大部分被顶体覆盖,因此常规精液分析无法观察到,只有通过电子显微镜才能进行结构评价。成熟的人类精子核主要由一些基础蛋白组成的类角蛋白样块状物及DNA构成,具有一定的抗破坏作用,其中的DNA既不会被声处理所拆散,也不会被DNA酶所消化,只有在较强的溶剂如去污剂、酸及源于细菌的溶解酶作用下才会被部分解聚。核的这种较强的非反应性对于保护精子基因组的遗传性、免于其在通过女性生殖道时的物理或化学损伤起到重要作用。在密实的核中常有一个或两个无膜包绕的稀疏区,其内含有稀少的颗粒样或丝样物质,这种泡样改变是染色质浓缩过程不均匀的结果。广东省妇幼保健院中医科潘明沃
1、进入卵细胞的精子,尾部迅速退化,细胞核膨大形成雄性原核,并与雌性原核融合,形成受精卵。
2、但现有研究显示,大部分精子在穿越卵丘细胞层时顶体反应已经启动。
3、其他调控通路还包括磷脂酶C-γ1--γPLC-γ1受体、钙离子等通路。
4、精子发生顶体反应后,顶体内容物丢失,则顶体内无荧光。
5、精子顶体反应的检测方法常用的有:凝集素免疫荧光染色法;
6、正常精子头部与顶体之间界限清晰,顶体约占头部的40%-70%。
7、检测精子顶体反应及顶体酶活性有助于预见精子的受精能力,可作为不育症的诊断指标之一。
8、随后前顶体囊泡逐渐融合形成了一个大的顶体囊泡。
9、考马斯亮蓝染色法:考马斯亮蓝能将蛋白染成紫蓝色,精子顶体内含大量的酶等蛋白质,易被考马斯亮蓝着色,顶体反应后,内容物丢失,则顶体区不着色或着色浅。
10、顶体反应同样是一种特殊的胞吐事件,许多顶体内物质通过膜融合的形式形成囊泡,被释放出精子。
常规精液分析的方法有精子计数、精子正常形态比率。但是这些方法对全面了解精子生育力尚嫌不足。精子顶体酶参与精子受孕过程。精子顶体酶含量降低会引起精子生育力下降‘j。精子顶体的完整性能直接反映精子顶体酶含量的多少,因顶体不完整的精子顶体酶会漏出。鉴此我们测定了124例男性精液的精子顶体完整率,研究它与精液常规分析指标之间的关系,并将正常男性与不育男性的PIA进行了比较。材料与方法
一、精液收集收集正常生育男性精液50份,不育男性精液74份,年龄2540岁;精液以手法收集,禁欲3天以上。正常生育男性其配偶已生育或妊娠,精子计数40X10’ml以上,活动率大于60。H、精子PIA测定
1、精子染色:姬姆萨氏染色法。
2、染液配制:姬姆萨氏染料0sg;甲醇35m人先将染料置于甘油中60水浴2小时,使其溶解,然后加入60预热的甲醇,混合后置棕色瓶内放置数天后用。
3、染色方法:液化精液涂片干燥后甲醇固定35分钟。配好的染色液用磷酸缓冲液稀释1020倍。固定好的涂片用染液染5分钟;染好的徐片流水冲洗晾干,用油镇检查计数2O0个精子。根据顶体外形和损伤情况将精子顶体分为四种类型。I型:顶体完整,精子外型正常,着色均匀,顶体边缘整齐。刀型:顶体轻微肿胀,质膜疏松膨大。血型:顶体破坏,精子质膜严重膨胀破损,着色浅,边线不整齐。w型:顶体全部脱落,精子核裸露。I、I型视为顶体完整;豆、IV型视为顶体不完整。精子PIA计算如下。结果
一、精子PIA与精子浓度及活动率之间的关系将所有标本的精子PIA测定的结果与其常规分析的精子浓度、活动率进行相关分析,发现精子PIA与浓度存在显著相关性计一07121,PwtO
01),与精子活动率存在显著相关性计一06382,P
001)。
二、将不育男性按精子浓度不同分组,分别比较它们的精子PIA,并与正常男性PIA比较,见表1。结果显示精子数在40X10’组的精子PIA明显高于精子数少于15X10’组。正常生育组精子PIA和精子浓度与之相同组的PIA,比较有显著差异。表1不同浓度精子PIA测定值表2不同活动车精子的PIA测定伍A与其他组比较有显著的差异;。正常生育组不同精子活动率的PIA测定见表2。显示活动率to60组的PIA明显高于wt30组,与正常生育组比较活动率60组的PIA较低。讨论精子顶体在生育方面起着重要作用,通过特殊染色或电镜确定精子顶体的完整情况是判断精子生育力很有价值的一种方法’1。在精子与卵子结合过程中,顶体中的顶体酶起着重要作用,顶体损坏的精子顶体酶就会漏出,影响精子对卵细胞卵丘的分解及对透明带的穿透。
1、因为圆头精子的顶体酶活性缺少或活性减少,造成精子不可以穿越放射冠和透明带,进而不可以与卵细胞融合授精。
2、精子顶体的产生经高尔基体其、顶体帽期、顶体期和成熟。
3、完全型圆头精子症病人因为精子缺乏有作用的顶体,自然生育的可能几乎为零。
4、而进一步的细胞生物学确诊则必须借助基因panel或全外显子测序技术检验圆头精子症有关发病基因的基因突变状况。
5、现阶段已发觉很多的基因参加调控顶体的产生,而PICKSPATADPY19L2等基因的基因变异将造类顶体的完全缺少,进而产生圆头精子。
6、依据圆头精子所占的比率可划分为完全型和部分型,圆头精子症的发病原因比较复杂,现阶段觉得与精子顶体生长发育出现异常息息相关。
7、圆头精子是临床医学一种罕见的造成男性不孕不育的特殊类型畸型精子,圆头精子的首要特性是精子头顶部正圆形且伴顶体缺少。
8、圆头精子症的确诊并不繁杂,根据精子形态学查验就可以对圆头精子开展精确的确诊。
1、广东省中医院生殖医学中心蒋满波蓝色部分是顶体包含顶体酶为什么要检测精子顶体酶活性?
2、如果顶体酶浓度极低,也可在医生指导下,服用一些健脾补肾、活血化瘀的中药,坚持长期治疗。
3、其次,精子质量好也不一定含有正常活性的顶体酶,而精子质量差也不代表顶体酶活性异常,因为顶体酶活性的高低与多种因素有关。
4、原标题:为啥做了精液常规,还要检查顶体酶?
5、部分不明原因不育夫妇,男方精液常规分析指标均正常,但在行IUI或IVF治疗时成功率较低,可能与顶体酶活性低有关。
6、但受精是一个极其复杂的过程,即便精子顶体酶活性正常,也不能完全肯定受精功能正常。
7、精子遇到卵子时,释放顶体酶,溶解卵子周围的放射冠和透明带,精子与卵子顺利结合,形成受精卵,才有了新的生命的诞生。
8、精子发育异常、微量元素及代谢物质缺乏、支原体及细菌感染等均可能导致顶体酶活性降低。
9、现代男性往往工作压力大,生活习惯不好,经常熬夜,这些也可能造成顶体酶缺乏。
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